Антибиотики чувствительные к стафилококку

Выявление резистентности к метициллину и другим бета-лактамным антибиотикам методом скрининга

Антибиотики чувствительные к стафилококку

методическое пособие

Автор

    А.В. ДехничИнститут антимикробной химиотерапии, г.Смоленск

Рецензенты

    А.Н. МаянскийЗаведующий кафедрой микробиологии Нижегородской медицинской академииВ.В. ТецЗаведующий кафедрой микробиологии Санкт-Петербургской медицинской академии им. ак. И.П. Павлова

С момента появления в 70-х годах и до настоящего времени метициллинрезистентные стафилококки и, прежде всего, метициллинрезистентные штаммы Staphylococcus aureus (MRSA) являются одними из ведущих возбудителей нозокомиальных инфекций. Частота MRSA в структуре стафилококковых инфекций за последние годы резко возросла во всём мире (например в США – с 2% в 1975 г. до 35% в 1996 г.).

Резистентность стафилококков к оксациллину (метициллину) может быть обусловлена тремя основными механизмами:

  • продукцией дополнительного пенициллинсвязывающего белка (ПСБ) – ПСБ-2а (фермента, участвующего в синтезе клеточной стенки), кодируемого хромосомальным геном “mecА” – классическая или истинная резистентность к метициллину (оксациллину);
  • инактивацию вследствие гиперпродукции бета-лактамаз;
  • модификацию нормальных ПСБ.

С клинической точки зрения важно дифференцировать штаммы с классической (“mecА“-обусловленной) резистентностью, от штаммов с двумя другими редко встречающимися механизмами резистентности, обусловливающими низкий или пограничный уровень устойчивости.

Это связано с тем, что при инфекциях, вызванных штаммами с mecA-обусловленной резистентностью терапия бета-лактамными антибиотиками (пенициллинами, цефалоспоринами, карбапенемами) будет неэффективна, кроме того, эти штаммы часто бывают резистентны практически ко всем другим классам антибиотиков, за исключением гликопептидов (ванкомицин, тейкопланин).

Фенотипические характеристики, которые могут помочь дифференцировать три перечисленные выше механизма резистентности, изложены в таблице:

Таблица. Типы резистентности к метициллину (оксациллину) у стафилококков.

Тип резистентности Наличие гена “mec А” Механизм Пограничная резистентность Эффективность ингибиторов бета-лактамаз Перекрестная резистентность ко всем бета-лактамам Множественная резистентность к другим классам антибиотиков
Классическая- гомогенная- гетерогенная++Дополнительный ПСБ (ПСБ-2а)–+/–––++++
Инактивация бета-лактамазамиГиперпродукция бета-лактамаз++
Модифицированные ПСБ (1,2,4)Мутации обычных ПСБ (1,2,4)+

Штаммы с классическим типом резистентности могут в свою очередь быть гомо- или гетерогенными по типу экспрессии резистентности.

При гомогенном типе экспрессии практически все микробные клетки проявляют резистентность в стандартных in vitro тестах, в то время как при гетерогенном типе только небольшая часть клеток проявляет резистентность фенотипически. Нередко только 1 из 10-100 млн.

клеток в популяции с наличием гена mecА экспрессирует резистентность, что ведёт к получению пограничных результатов при определении чувствительности к оксациллину (МПК – 2-8 мг/л).

Резистентность, обусловленная гиперпродукцией бета-лактамаз и мутацией нормальных ПСБ, также приводит к получению пограничных значений МПК. Однако, резистентность к оксациллину, обусловленную гиперпродукцией бета-лактамаз, можно легко отличить от классической резистентности по обратимости резистентности при использовании ингибиторов бета-лактамаз.

В отличие от штаммов с классической резистентностью гиперпродуценты бета-лактамаз и штаммы с мутациями нормальных ПСБ обычно не имеют множественной резистентности к другим антибиотикам.

Наличие классической резистентности наиболее легко определить методом скрининга так как рост микробных клеток с неклассическими типами резистентности обычно ингибируется.

Примечание Для определения чувствительности используется оксациллин ввиду его более высокой стабильности при хранении по сравнению с метициллином.

Принцип

Для идентификации резистентности к оксациллину (метициллину) у стафилококков необходимо соблюдение следующих условий:

  1. Наличие в агаре NaCl в концентрации 4%
  2. Сниженная температура инкубации – при 35oС
  3. Строгое соблюдение длительности инкубации: 24 часа для S.aureus и 48 часов для коагулаза(-) стафилококков
  4. Стандартизированное число микроорганизмов – 1,5 х 108
  5. рН 7,2-7,4, так как при более низком рН увеличивается число ложноотрицательных результатов

Микроорганизм

Чистая культура Staphylococcus spp., инкубированная в течение 18-24 часов на кровяном агаре.

Материалы

  1. Агар Мюллер-Хинтон с добавлением 4% NaCl (4 г на 100 мл среды) и 6 мг/л оксациллина (0,6 мг на 100 мл среды). Агар Мюллер-Хинтон хранится при 2-8oС, готовится согласно прописи на этикетке, 4% NaCl добавляется до автоклавирования.
  2. Субстанция оксациллина с известной активностью предварительно растворяется в стерильной дистиллированной воде (расчет концентрации оксациллина проводят с учетом его активности) и добавляется в охлажденный на водяной бане до 48-50oС агар Мюллер-Хинтон.

    Приготовленный агар разливается по чашкам с толщиной слоя агара 3-4 мм (на чашку диаметром 100 мм – 25 мл). Готовые чашки со средой хранятся в пластиковых пакетах при температуре 4-8oС не более 5 суток.

  3. Для контроля роста необходимо также приготовить чашки с агаром без антибиотика.

  4. Кровяной агар с чистой культурой стафилококка, инкубированной в течение 18-24 ч.
  5. Стерильный физиологический раствор.
  6. Стандарт мутности 0,5 по МакФарланду.
  7. Стерильные тампоны или микропипетка (10 мкл).
  8. Термостат с температурой 35oС.

Контроль качества

  1. Исследование проводят при обязательном контроле роста испытуемых культур на агаре Мюллер-Хинтон с 4% NaCl без оксациллина (культуру наносят так же, как на агар с оксациллином).
  2. Контрольные штаммы (могут быть предоставлены Институтом антимикробной химиотерапии):
    S.aureus ATCC 38591 – резистентный.
    S.aureus ATCC 29213 – чувствительный.

Приготовление инокулюма

Бактериальную взвесь стафилококка готовят из нескольких колоний с одинаковой морфологией на стерильном физиологическом растворе (3 мл) и доводят до мутности 0,5 по Мак Фарланду (1,5×108 КОЕ/мл).

Инокуляция

  1. Метод I (микропипеткой)
    а) приготовить разведение 1:100 стандартного инокулюма 0,5 по МакФарланду для получения бактериальной взвеси, содержащей 1,5×106 КОЕ/мл (например, добавить 0,1 мл стандартной суспензии к 9,9 мл стерильного физ. раствора).

    б) с помощью микропипетки нанесите каплю (10 мкл) разведённой стандартной суспензии на поверхность агара с оксациллином.

  2. Метод II (с помощью тампона)а) погрузите стерильный ватный тампон в пробирку со стандартизированной суспензией (0,5 по МакФарланду), затем отожмите избыток влаги о стенку пробирки

    б) коснитесь тампоном поверхности агара с оксациллином.

Инкубация

Штаммы S.aureus инкубируются при температуре +35oС в течение полных 24 часов, а коагулаза(-) стафилококков – в течение 48 часов.

Примечание. Среда АГВ не может быть рекомендована для постановки теста в связи с высокой частотой ложноположительных результатов.

Интерпретация

  1. Появление видимого роста более 1 колонии на месте нанесения культуры означает устойчивость данного штамма к оксациллину (метициллину).
  2. При отсутствии роста на месте нанесения культуры исследуемый штамма учитывается как чувствительный к метициллину (оксациллину).
  3. При получении сомнительных результатов, а также для штаммов, выделенных у больных с клинически неэффективной терапией и у больных с серьезными инфекциями, необходимо провести развернутое исследование с определением МПК к оксациллину и гена mecA.

Представление результата

  1. S.aureus или коагулаза(-) стафилококк (S.epidermidis), чувствительный к метициллину (оксациллину).
  2. S.aureus или коагулаза(-) стафилококк (S.epidermidis) резистентный к метициллину (MRSA или MRSE).
Метициллин (оксациллин) – резистентные стафилококки должны расцениваться как резистентные ко всем бета-лактамам (пенициллинам, цефалоспоринам, карбапенемам, комбинациям пенициллинов с ингибиторами бета-лактамаз). Кроме того, среди метициллинрезистентных стафилококков очень часто наблюдается ассоциированная резистентность к другим антибиотикам (аминогликозидам, макролидам, хинолонам, тетрациклинам).

Ограничения метода

  1. Скрининг на агаре с оксациллином предназначен для фенотипического определения штаммов имеющих ген mecA, однако, штаммы с другими типами резистентности иногда могут давать ложноположительный результат.
  2. Применение метода скрининга для выявления резистентности к оксациллину (метициллину) менее надёжен у коагулаза(-) стафилококков, чем у S.aureus.

Примечание

Оксациллин, в сравнении с метициллином, менее стабилен к действию стафилококковых бета-лактамаз, что может привести к получению большего числа ложноположительных результатов, чем при использовании метициллина. В то же время, метициллин, в сравнении с оксациллином, значительно менее стабилен при хранении, что и ограничивает его применение.

Ванкомицин-резистентный S.aureus

О возможности появления ванкомицинрезистентных S.aureus стали задумываться около десяти лет назад после сообщений о появлении резистентности к ванкомицину у энтерококков. Однако, прошло более десяти лет до появления первого сообщения в 1996 г. о выделении метициллинрезистентного S.

aureus со сниженной чувствительностью к ванкомицину (МПК 8 мг/л) из клинического материала. Несмотря на значение МПК к ванкомицину, соответствующее диапазону умеренной резистентности, данный штамм был зарегистрирован как VRSA (ванкомицинрезистентный S.aureus), ввиду клинической неэффективности ванкомицина.

У этого штамма не было найдено ни одного из ранее известных механизмов резистентности к ванкомицину; отмечено только увеличение толщины клеточной стенки и концентрации пенициллинсвязывающих белков 2 и 2а. Далее, одно за другим последовали сообщения о выделении из клинического материала штаммов S.

aureus с МПК к ванкомицину 8 мг/л и получивших обозначение VISA (S.aureus со сниженной чувствительностью к ванкомицину).

В результате углубленного исследования ванкомицинрезистентности у MRSA, при скрининге более чем 2000 штаммов из различных стационаров, было выявлено от 1% до 25% (!) штаммов с гетерогенной (индуцибельной) резистентностью к ванкомицину, экспрессирующих её с частотой около 1 клетки на миллион. Такие штаммы могут являться предшественниками VRSA.

Специалисты до сих пор не пришли к согласию, какой термин использовать (VRSA или VISA), что связано с тем, что несмотря на значения МПК, соответствующее диапазону умеренной резистентности, налицо клиническая неэффективность ванкомицина при терапии VRSA и VISA инфекций. Другими словами, при отсутствии резистентности с фармакологической точки зрения, эти штаммы резистентны к ванкомицину с клинической и биологической точек зрения.

Многие специалисты предлагают свои методы для скрининга ванкомицинрезистентности у стафилококков, однако, до сих пор не разработано общепринятых стандартов.

Таким образом, чрезвычайно важным является разработка методов лабораторной диагностики и мониторинга ванкомицинрезистентности, особенно у пациентов, получающих или получавших терапию ванкомицином/тейкопланином и при неэффективности этой терапии.

Следует разработать методики для контроля за VRSA-инфекциями, предпринять меры по изоляции больных и носителей для предупреждения распространения VRSA. Кроме того, политика применения антибиотиков должна предусматривать снижение необоснованного назначения ванкомицина.

В России пока что не было описано ни одного штамма S.aureus со сниженной чувствительностью к ванкомицину, вероятнее всего в связи с редким использованием ванкомицина в клинической практике.

Литература

  1. Сидоренко С.В. Метициллинрезистентные стафилококки. Антибиотики и химиотерапия, 1995; 11: 12: 57-69.
  2. Performance standarts for antimicrobial susceptibility testing, NCCLS; Ninth information supplement, 1999; M100-S9: 19: 18.
  3. Isenberg H.D. Essential procedures for clinical microbilogy. 1998; 232-234.
  4. Swenson J.M., e.a. Special tests for detecting antibacterial resistance. In Murray PR, e.a. eds. Manual Clin. Microbiol. 1995; 1359-1360.
  5. Wenzel R.P., Edmind M.B. Vancomycin-resistant Staphylococcus aureus: infection control considerations. Clin. Infect. Dis. 1998; 27: 245-251.
  6. Working party report. Revised guidelines for the control of methicillin-resistant Staphylococcus aureus infection in hospitals. J. Hosp. Infect. 1998; 39: 253-290.

© 2000-2009 НИИАХ СГМА

Источник: http://www.antibiotic.ru/rus/all/metod/meticres/

Посев на золотистый стафилококк (S. aureus), количественный результат

Антибиотики чувствительные к стафилококку

[10-062] Посев на золотистый стафилококк (S. aureus), количественный результат

700 руб.

Микробиологическое исследование, позволяющее выявить инфицированность золотистым стафилококком и определить количество возбудителя.

 При выявлении патогенных и/или условно-патогенных микроорганизмов будет определена их чувствительность к антимикробным препаратам (антибиотикам и бактериофагам).

 В ином случае чувствительность к антибиотикам и бактериофагам не определяется, т.к. не имеет диагностического значения.

Синонимы английские

Staphylococcus aureus culture, MRSA culture (Methicillin-resistant S. aureus culture), quantitative.

Метод исследования

Микробиологический метод.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Грудное молоко, кал, мазок из зева, мазок с конъюнктивы, мазок из носа, мазок урогенитальный (с секретом предстательной железы), мокроту, отделяемое раны, отделяемое уха, ректальный мазок, среднюю порцию утренней мочи.

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • Рекомендуется употребить большой объем жидкости (воды) за 8-12 часов до сбора мокроты.
  • Исследование рекомендуется проводить до начала приема антибиотиков и других антибактериальных химиотерапевтических препаратов.
  • Исключить прием мочегонных препаратов в течение 48 часов до сбора мочи (по согласованию с врачом).
  • Исключить прием слабительных препаратов, введение ректальных свечей, масел, ограничить прием медикаментов, влияющих на перистальтику кишечника (белладонна, пилокарпин и др.) и на окраску кала (железо, висмут, сернокислый барий), в течение 72 часов до сбора кала.
  • Женщинам исследование (процедуру взятия урогенитального мазка или сбор мочи) рекомендуется производить до менструации или через 2-3 дня после ее окончания.

Общая информация об исследовании

Золотистые стафилококки (Staphylococcus aureus) – грамположительные условно-патогенные бактерии рода Staphylococcus, являющиеся наиболее частой причиной стафилококковых, в частности внутрибольничных, инфекций. Золотистые стафилококки в норме могут располагаться на коже, слизистой оболочке носа и реже в гортани, влагалище, кишечнике. Они встречаются у 30  % здоровых людей.

Если у человека слабая иммунная система или нарушен нормальный состав микрофлоры, то при повреждении кожи (слизистых оболочек) золотистый стафилококк может приводить к разнообразным местным и системным инфекционно-воспалительным поражениям:

  • кожи (карбункулам, импетиго, фолликулиту),
  • молочных желез (маститу),
  • дыхательных путей и ЛОР-органов (тонзиллиту, гаймориту, отиту, фарингиту, ларинготрахеиту, пневмонии),
  • мочевыводящих путей (уретриту, циститу, пиелонефриту),
  • пищеварительной системы (энтероколиту, аппендициту, перитониту, парапроктиту, холециститу),
  • костно-суставной системы (остеомиелиту, артриту).

В отдельных случаях возможна генерализация инфекции с развитием септикопиемии. Производимый золотистым стафилококком энтеротоксин вызывает пищевые отравления и синдром токсического шока.

Основные источники инфекции: здоровые (носители) и больные люди, домашние и сельскохозяйственные животные, а также пища, содержащая возбудителя инфекции (чаще всего это сахаросодержащие молочные продукты).

Инфицирование может происходить контактным и воздушно-пылевым путем. Возможно аутоинфицирование.

Для идентификации золотистого стафилококка проводится посев клинического материала на питательные среды, где при наличии S. aureus через 18-24 часа наблюдается рост колоний золотистого цвета.

Определение количества бактерий может потребоваться, например, чтобы понять, нужно ли проводить лечение: в некоторых случаях, если количество небольшое, лечение не проводится. Решение о его необходимости зависит от клинических проявлений, а также от количества стафилококка. При небольшом содержании микробов и отсутствии симптоматики лечение может вообще не понадобиться, т. к.

и в норме на слизистой могут находиться эти микробы. Стафилококк в кишечнике обнаруживается постоянно, это не повод для лечения, но если его количество превышено, тогда нужны меры (бактерия может вызывать колики и расстройства).

Стафилококк в мазке без симптомов вагинита также является нормой, в то время как большие количества стафилококка в мазке, наряду с повышением лейкоцитов, требуют лечения.

Наличие стафилококка не обязательно означает инфекцию, это может быть бессимптомное носительство, например при посеве мазков из носа и зева носительством считается количество бактерий до 103. Однако более высокие показатели говорят нам о золотистом стафилококке как о причине заболевания, и это уже далеко не бессимптомное носительство.

Многое зависит от возраста пациента. Например, золотистый стафилококк в количестве 104 является вполне нормальным показателем для детей старше 1 года, но у грудных детей в таком количестве уже потребует лечения.

В любом случае наличие стафилококка при отсутствии симптомов болезни – еще не повод к назначению лекарств.

Количество стафилококка может определяться до и после лечения.

Если выясняется, что рост возбудителя обильный, значит, инфекция набирает обороты, предыдущая терапия была неудачной и срочно требуется новый курс лечения; умеренный и скудный рост микроорганизмов по результатам последних анализов говорит об успешности терапии. Кроме того, в дальнейшем необходимо контролировать количество стафилококков в течение 1 или 2 месяцев после пройденного лечения.

Отмечено также, что после пребывания больных в хирургической клинике стафилококк обнаруживался у них вдвое чаще, чем при поступлении. У больных, поступающих в стационары, наблюдается замена антибиотикочувствительных стафилококков на антибиотикоустойчивые.

Лечение больных стафилококковой болезнью препаратами пенициллина или другими давно применяемыми антибиотиками часто остается безрезультатным, поскольку такие препараты нередко только усугубляют тяжесть течения инфекции. Поэтому так важно установить, какие антибиотики будут эффективны при лечении стафилококка.

Для чего используется исследование?

  • Для определения целесообразности лечения.
  • Для дифференциации бактерионосительства и опасного инфицирования.
  • Для контроля за состоянием пациента после проведенного лечения.
  • Для того чтобы подтвердить, что стафилококк является причиной возникшего заболевания (об этом свидетельствуют высокие показатели посева).

Что означают результаты?

Референсные значения: нет роста.

Золотистый стафилококк в мазке в небольших количествах является частью нор­мальной микрофлоры человека. Значительное повышение стафилококка в мазке может быть симптомом воспалительного процесса, кожных инфекций (угри и пр.) и очень опасных заболеваний (пневмония, остеомиелит, эндокардит и др.). Результат посева интерпретирует врач исходя из того, в каком количестве выделены микроорганизмы.

Кто назначает исследование?

Терапевт, врач общей практики, педиатр, ЛОР, инфекционист.

Литература

  • Moreillon P., Que Y.-A., Glauser M.P. Staphylococcus aureus (Including Staphylococcal Toxic Shock). In: Principles and practice of infectious disease / G.L. Mandell, Bennett J.E., Dolin R (Eds) ; 6th ed. – Churchill Livingstone, Philadelphia, PA 2005. – 2701 p.

Источник: https://helix.ru/kb/item/10-062

Staphylococcus aureus (стафилококк золотистый)

Антибиотики чувствительные к стафилококку

Представленная в разделе информация о лекарственных препаратах, методах диагностики и лечения предназначена для медицинских работников и не является инструкцией по применению.

Стафилококк золотистый (Staphylococcus aureus) — наиболее патогенный вид стафилококков, возбудитель гнойно-воспалительных поражений у человека.

Золотистый стафилококк чаще всего колонизирует носовые ходы, подмышечные области. Хроническое носительство типично для персонала медицинских учреждений, больных атопическими дерматитами, наркоманов.

Основным резервуаром золотистых стафилококков у здоровых людей является полость носа. Однако золотистые стафилококки также могут обитать и в гортани, в области промежности, в подмышечных областях, на волосистой части кожи головы и в желудочно-кишечном тракте.

В первые 2 года жизни только 20 % детей являются носителями золотистых стафилококков в полости носа. В 4–6 лет золотистые стафилококки имеются в носу у 30–50 % детей. Золотистые стафилококки обнаруживаются в полости носа у 12–50 % взрослых, не связанных с больницами. После госпитализации носителями, в основном больничных штаммов золотистых стафилококков, становится 20–30 % пациентов. Особенно это касается пациентов, принимавших антибиотиками, больных диабетом или инфекционными заболеваниями находящихся на гемодиализе. Больничные штаммы золотистых стафилококков ответственны за многие гнойные заболевания и раневые инфекции в стационарах. Наличие золотистых стафилококков в носовых ходах может быть причиной возникновения раневых инфекций. Среди медицинского персонала носительство золотистого стафилококка в носовых ходах может достигать 35 %. Золотистый стафилококк появляется после первой менструации у 5–15 % женщин. Количество носительниц золотистого стафилококка увеличивается во время менструаций и достигает 30 % женщин.

Staphylococcus aureus является уреазо-продуцирующей бактерией. Поэтому присутствие Staphylococcus aureus в желудке пациента может стать причиной ложноположительных результатов уреазных тестов на Helicobacter pylori, включая быстрый уреазный тест при биопсии (Старостин Б.Д.).

На сайте GastroScan.ru в разделе «Литература» имеется подраздел «Микрофлора, микробиоценоз, дисбиоз (дисбактериоз)», содержащий статьи, затрагивающие проблемы микробиоценоза и дисбиоза отделов ЖКТ человека.

Некоторые штаммы золотистого стафилококка приобрели резистентность к широкому кругу антибиотиков, в частности к пенициллинам (метициллин, диклоксациллин, нафциллин, оксациллин и т.д.) и цефалоспоринам. Эти штаммы, называющиеся метициллин-резистентые (или метициллинрезистентые, или MRSA от англ. Methicillin-resistant Staphylococcus aureus) золотистые стафилококки , получают широкое распространение. В США количество зараженных метициллин-резистентым золотистых стафилококков увеличивается на 10 % ежегодно. Заражение  метициллин-резистентым золотистым стафилококком возможно в любых общественных местах. Смертность от инфекций метициллин-резистентного золотистого стафилококка составляет около 30 %. Ежегодно только в США от инфекций, обусловленных метициллин-резистентым золотистым стафилококком, умирают более 20 тысяч человек.  Количество золотистого стафилококка определяется при анализе кала на дисбактериоз. Кроме того, исследование на золотистый стафилококк и метициллин-резистентный золотистый стафилококк кала, отделяемого ротоглотки, носа, околоносовых пазух и другого биологического материала выполняется при подозрении на стафилококковую инфекцию или бактерионосительство, а также при периодическом обследование медицинского персонала хирургических отделений стационаров и родильных домов. В норме в результатах анализов золотистый стафилококк должен отсутствовать.

Так как золотистый стафилококк является единственным коагулаза-положительным патогенным стафилококком, то определение типа стафилококка (S. aureus или нет) в биологическом материале человека производится с помощью теста на коагулазу.

Антибактериальные средства (из имеющих описание в данном справочнике), активные в отношении золотистого стафилококка: кларитромицин, азитромицин, джозамицин, амоксициллин, рифаксимин, фуразолидон, нифуроксазид, ванкомицин, нифурател, ципрофлоксацин, норфлоксацин, офлоксацин, клиндамицин, тетрациклин, линкомицин, клотримазол. Большинство метициллин-резистентных золотистых стафилококков устойчивы к ципрофлоксацину, рокситромицину. Метициллин-чувствительные штаммы золотистых стафилококков чувствительны к левофлоксацину, моксифлоксацину, рокситромицину.

В отношении Staphylococcus aureus также активны насыщенные жирные кислоты, в большей степени те из них, которые имеют от 8 до 16 атомов углерода. Антибиотическая активность насыщенных жирных кислот существенно зависит от кислотности среды. При увеличении рН от 6 к 7 активность, например, лауриновой кислоты по отношению к Staphylococcus aureus быстро падает.

Вид золотистый стафилококк относится к роду стафилококки (Staphylococcus), который входит в семейство Staphylococcaceae, порядок Bacillales, класс Bacilli, тип Firmicutes, Terrabacteria group, царство Бактерии. Staphylococcus aureus упоминается в «Классе I. Некоторые инфекционные и паразитарные болезни (A00-B99)» Международной классификации болезней МКБ-10, он включён в блоки:

Назад в раздел

 

Источник: https://www.gastroscan.ru/handbook/118/3357

Определение антибиотикочувствительности выделенных штаммов гемолитических стафилококков микробиомы зева студентов медицинского института

Антибиотики чувствительные к стафилококку
1 Степаненко И.С. 1 Костина Ю.А. 1 1 ФГБОУ ВПО «Мордовский государственный университет им. Н.П. Огарева» Представители рода Staphylococcus у большинства людей являются частью нормальной микробиоты кожных покровов, слизистых оболочек и нижнего отдела кишечника. Важность изучения бактерионосительства S.

 aureus определяется типичностью процесса переноса стафилококков с наружных кожных покровов и слизистых оболочек во внутреннюю среду организма хозяина и развитие инфекционных заболеваний.

Проведено изучение носительства гемолитических штаммов стафилококков у здоровых молодых людей в открытом коллективе и определение чувствительности выделенных штаммов к 14 антибактериальным препаратам диско-диффузионным методом, с применением набора дисков («Биорад»).

Чувствительность к антибиотикам, выделенных из зева гемолитических штаммов стафилококков определяли у 350 студентов без клинических признаков респираторной патологии в возрасте 18–19 лет. Материалом для исследования служили смывы из зева. Выделение и верификацию гемолитических штаммов микроорганизмов проводили бактериологическими методами по стандартной методике.

В результате исследования от 350 практически здоровых студентов без клинических признаков патологии носоглотки и верхних дыхательных путей было выделено 23 гемолитических штамма, идентифицированных как представители рода Staphylococcus spp. антибиотикочувствительность 1. Бакшеева С.С.

Влияние неблагоприятных факторов окружающей среды на антибиотикорезистентность стафилококков, выделенных от резидентных бактерионосителей // Вестник КрасГАУ. – 2013. – № 10. – С. 106–108. 2. Дерябин Д.Г. Стафилококки: экология и патогенность. – Екатеринбург: Изд-во УРО РАН, 2000. – 238 с. 3. Дехнич А.В., Данилов И.А.

Даптомицин: обзор фармакологических, клинических и микробиологических параметров // Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. – 2010. – Т. 12. – № 4.
4. Приказ Министерства здравоохранения СССР № 535 от 22 апреля 1985 г.

«Об унификации микробиологических (бактериологических) методов исследования, применяемых в клинико-диагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений».
5. Савельев В.С. Стратегия и тактика применения антимикробных средств в лечебных учреждениях России: Российские национальные рекомендации / под ред. В.С. Савельева, Б.Р. Герфельда, С.В. Яковлева. – М.

: ООО «Компания БОРГЕС», 2012. – 92 с.
6. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования / под ред. М.О. Биргера. – М., 1982. – С. 125–129.
7. Perl T.M. New approaches to Staphylococcus aureus nosocomial infection rates: treating S.aureus nasal carriage // Ann. Pharmacother. – 1998. – Vol. 32, № 1. – Р. 7–16.
8. Wenzel R.P., Edmind M.B.

Vancomycin-resistant Staphylococcus aureus: infection control considerations // Clin. Infect. Dis. – 1998. – Vol. 27. – Р. 245–251.

Различные штаммы стафилококков присутствуют у большинства людей и являются частью нормальной микробиоты кожных покровов, слизистых оболочек и нижнего отдела кишечника.

Важное значение со стороны клинической практики и эпидемиологического надзора имеет бактерионосительство S. aureus, являющегося возбудителем многих инфекционных заболеваний человека. Стафилококками продуцируется большое количество факторов патогенности и токсинов. В настоящее время у стафилококков выделено и изучено более 30 различных экзотоксинов, эндотоксинов и суперэнтеротоксинов. Факторы патогенности микробов различными механизмами действуют на иммунную систему человека, что приводит к снижению сопротивляемости организма и развитию как острых, так и хронических форм заболеваний стафилококкового генеза. По данным литературных источников, приблизительно 40 % людей являются постоянными носителями S. аureus на слизистых оболочках крыльев носа, зева, коже подмышечных впадин и промежности, оставшуюся часть популяции относят к транзиторным и случайным носителям [1].

Важное клиническое значение бактерионосительства определяется типичностью процесса транслокации (переноса) стафилококков с наружных кожных покровов и слизистых оболочек во внутреннюю среду организма хозяина с развитием широкого спектра заболеваний [2, 3, 4].

Неблагоприятные факторы окружающей среды влияют не только на макроорганизм, но и на колонизирующие его микроорганизмы. В частности, усиливают действие механизмов агрессии потенциально патогенных бактерий и способность противостоять действию антибактериальных препаратов.

Следовательно, стафилококки представляют опасность как для самого бактерионосителя, так и в эпидемиологическом плане, попадая в окружающую среду [5].

Лечение и профилактика стафилококковых инфекций заключается в стимуляции иммунологической реакции организма (активная и пассивная профилактика), направленной на элиминацию не только самого микроорганизма, но и на нейтрализацию его токсинов.

В современной практике для лечения стафилококковых инфекций чаще применяются антибактериальные препараты. До открытия антибиотиков смертность от инвазивных стафилококковых инфекций достигала 90 %. Антибиотики позволили значительно снизить смертность, но не стали радикальным решением проблемы [6].

Невозможность окончательно победить инфекцию с помощью антибиотиков кроется в фундаментальном свойстве живой материи – в том же, которое делает возможной эволюцию – в способности к мутациям. Любой антибиотик с точки зрения эволюции – просто неблагоприятный фактор окружающей среды.

Действует он не на единичную бактерию, а на многочисленную популяцию, в которой бактерии не абсолютно идентичны благодаря спонтанным мутациям. Как правило, мутанты менее жизнеспособны, чем «нормальные» организмы.

Ещё одна причина неэффективности лечения инфекций с помощью антибиотиков – стратегия, которую применяют многие практикующие врачи.

Зачастую не проводится бактериологическое исследование и верификация возбудителя инфекции с последующим исследованием его чувствительности к антибиотикам. Получается нонсенс: лечение без диагностики [7].

Теряется время, пациент страдает не только от инфекции, но и от побочных эффектов антибиотика.

Цель работы – изучить наличие в микробиоме зева гемолитических штаммов стафилококков у здоровых молодых людей в открытом коллективе и определить чувствительность выделенных штаммов к антибактериальным препаратам, применяемым в практическом здравоохранении.

Материалы и методы исследования

Чувствительность к антибактериальным препаратам выделенных из зева гемолитических штаммов стафилококков определяли у 350 студентов медицинского института без клинических признаков респираторной патологии в возрасте 18–19 лет. Материалом для исследования служили смывы из зева.

Выделение и верификацию гемолитических штаммов микроорганизмов проводили бактериологическими методами по стандартной методике [8].

Чувствительность выделенных микроорганизмов определяли к четырнадцати антибактериальным препаратам: пенициллину, ванкомицину, линезолиду, эритромицину, левофлоксацину, фузидину, клиндамицину, гентамицину, доксоциклину, оксациллину, рифампицину, ципрофлоксацину, левомицетину и ко-тримаксозолу диско-диффузионным методом в соответствии с «Методическими указаниями по определению чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам» (МУК 4.2.1890-04 МЗ РФ, 2004), с применением расширенного набора дисков («Биорад»).

Результаты исследования и их обсуждение

В результате исследования от 350 практически здоровых студентов без клинических признаков патологии носоглотки и верхних дыхательных путей было выделено 23 гемолитических штамма, идентифицированных как представители рода Staphylococcus spp.

У 7 % студентов без клинических признаков патологии носоглотки и верхних дыхательных путей выявлены гемолитические штаммы Staphylococcus spp. (рис. 1).

Рис. 1. Частота выявления гемолитических штаммов Staphylococcus spp. в микробиоме зева студентов, %

Рис. 2. Частота выявления видов Staphylococcus spp. в микробиоме зева студентов, %

Культуры, выделенные со слизистой оболочки зева, были представлены гемолитическими штаммами S. aureus – 18, S. epidermidis – 3, S. saprophyticus – 2 изолята (рис. 2). MRSA штаммы Staphylococcus spp. не выявлены.

Выделенные штаммы S. aureus в 100 % случаев чувствительны к следующим антибактериальным препаратам: пенициллину, ванкомицину, линезолиду, эритромицину, левофлоксацину, фузидину, клиндамицину, гентамицину, доксоциклину, оксациллину, рифампицину, ципрофлоксацину. В 6 и 50 % были устойчивы к левомицетину и ко-тримаксозолу соответственно (рис. 3).

Штаммы S. epidermidis чувствительны на 100 % к пенициллину, ванкомицину, линизолиду, эритромицину, левофлоксацину, левомицетину и ко-тримаксозолу. К фузидину, левомицетину чувствительны 33 % выделенных штаммов данного микроорганизма, к гентамицину и оксациллину чувствительны 27 %, к рифампицину 77 и 100 % не чувствительны к ципрофлоксацину (рис. 4).

Рис. 3. Чувствительность выделенных штаммов S. aureus к антибиотикам, %

Рис. 4. Чувствительность выделенных штаммов S. epidermidis к антибиотикам, %

Рис. 5. Чувствительность выделенных штаммов S. saprophyticus к антибиотикам, %

Изоляты S. saprophyticus чувствительны на 100 % к пенициллину, ванкомицину, линизолиду, левофлоксацину, левомицетину, гентамицину, доксоциклину и ципрофлоксацину, на 50 % к эритромицину, и не чувствительны к фузидину, клиндамицину, оксациллину, рифампицину и ко-тримаксозолу (рис. 5).

Выводы

Получены данные о вариантах и частоте носительства условно-патогенных и патогенных стафилококков (7 %) в микробиоте зева молодых людей, при котором не установлено формирование патологических процессов в зеве, что свидетельствует о динамическом равновесии биоценоза и не требует активной эрадикации стафилококков.

Рецензенты:

Шубина О.С., д.б.н., профессор, зав. кафедрой биологии, технологии и методик обучения, ФГБОУ ВПО «Мордовский государственный педагогический институт им. М.Е. Евсевьева», г. Саранск;

Ямашкин С.А., д.х.н., профессор кафедры химии, технологии и методик обучения, ФГБОУ ВПО «Мордовский государственный педагогический институт им. М.Е. Евсевьева», г. Саранск.

Библиографическая ссылка

Степаненко И.С., Костина Ю.А. Определение антибиотикочувствительности выделенных штаммов гемолитических стафилококков микробиомы зева студентов медицинского института // Фундаментальные исследования. – 2015. – № 7-3. – С. 489-492;
URL: http://www.fundamental-research.ru/ru/article/view?id=38765 (дата обращения: 08.02.2020).

Источник: https://www.fundamental-research.ru/ru/article/view?id=38765

Научная Сеть >> Результаты многоцентрового исследования чувствительности стафилококков к антибиотикам в Москве и Санкт-Петербурге

Антибиотики чувствительные к стафилококку
sh: 1: –format=html: not found
С.В. Сидоренко, С.П. Резван, С.А. Грудинина, Л.А. Кротова, Г.В. Стерхова

Государственный научный центр по антибиотикам, Москва

В начало…

Изучен уровень антибиотикочувствительности 898 штаммов стафилококков, выделенных в 9 медицинских учреждениях Москвы и Санкт-Петербурга. Частота выделения метициллинорезистентных Staphylococcus (MRS) колебалась для S.aureus в пределах от 0 до 40%, коагулазонегативных стафилококков (CNS) от 0 до 65,9%. Наибольшая частота выделения MRS отмечена в учреждениях гематологического, онкологического, травматологического профилей и отделениях интенсивной терапии новорожденных. Частота выделения MRS в Санкт-Петербурге была существенно ниже, чем в Москве. Среди метициллиночувствительных стафилококков частота продукции бета-лактамаз составила: у S.aureus – 81%, у CNS – 60%. Практически 100% штаммов были чувствительны к ампициллин/сульбактаму и цефалоспоринам I-III поколений, 86-99% штаммов были чувствительны к эритромицину, клиндамицину, тетрациклину, гентамицину, триметоприм/сульфаметоксазолу. Все штаммы MRS сохраняли чувствительность к ванкомицину; к фузидину, рифампицину и ципрофлоксацину сохраняли чувствительность соответственно 95, 84 и 70% штаммов S.aureus. Уровень чувствительности CNS был несколько ниже.

Ключевые слова:

стафилококки, MRS-штаммы, чувствительность к антибиотикам

Интенсивное совершенствование медицинских технологий за последние десятилетия обеспечило существенное повышение эффективности терапии при различных видах патологии, ранее с трудом поддававшихся лечению (эндокринные, сердечно-сосудистые, онкологические и другие заболевания).

Лечение пациентов, находящихся в критических состояниях, как правило, связано с проведением значительного количества инвазивных процедур, катетеризацией мочевого пузыря, интубацией трахеи.

У таких пациентов закономерно отмечают выраженное в различной степени снижение функциональной активности неспецифических клеточных и гуморальных механизмов противоинфекционной резистентности, нарушение барьерных функций слизистых оболочек.

В комплексе перечисленные факторы приводят к резкому повышению вероятности госпитального инфицирования пациентов, что требует проведения массивной антибиотикопрофилактики и терапии, следствием чего является селекция в стационарах микроорганизмов, устойчивых к антибиотикам, в том числе и с множественной ассоциированной устойчивостью.

Внедрение в медицинскую практику высокоэффективных беталактамных, аминогликозидных и фторхинолоновых препаратов обусловило определенное возрастание роли грамположительных микроорганизмов в структуре этиологических агентов госпитальных инфекций. При этом потенциально наиболее опасными являются метициллинорезистентные стафилококки (MRS) и энтерококки.

Значение MRS для медицинской практики обусловлено наличием у этих микроорганизмов перекрестной устойчивости ко всем беталактамным антибиотикам и ассоциированной резистентности к препаратам других классов, что крайне ограничивает возможности этиотропной терапии. Устойчивость к метициллину распространена как среди Staphylococcus aureus (SA), так и коагулазонегативных (coagulase-negative staphylococci – CNS).

Целью настоящей работы было изучение распространения MRS в стационарах Москвы и Санкт-Петербурга и оценка чувствительности стафилококков к антибиотикам, применяемым для лечения стафилококковых инфекций.

Материал и методы

На практике (в настоящем исследовании, в частности) при оценке антибиотикочувствительности стафилококков вместо метициллина используют оксациллин, так как последний отличается большей стабильностью при хранении, в этом случае термин оксациллинорезистентность является полным синонимом метициллинорезистентности.

В многоцентровом исследовании антибиотикочувствительности стафилококков приняли участие 9 лечебных учреждений различного профиля Москвы и Санкт-Петербурга: в Москве – Онкологический научный центр РАМН (ОНЦ), Центральный НИИ травматологии и ортопедии им. Н.Н.

Приорова (ЦИТО), НИИ гематологии (НИИГ), Городская клиническая больница N 15 (ГКБ15), Детская городская клиническая больница N 13 им. Н.Ф.

Филатова (ДГКБ13), Клиническая больница Управления делами Президента РФ (КБ УПД); в Санкт-Петербурге – Военно-медицинская академия (ВМА), Городская клиническая больница N 2 (ГКБ2), Медико-санитарная часть N 122 (МСЧ122). В период с сентября 1995 г. по май 1996 г.

в бактериологических лабораториях перечисленных учреждений было отобрано приблизительно по 100 последовательных штаммов стафилококков, выделенных из патологического материала, полученного от больных, находящихся на стационарном лечении. Идентификацию стафилококков проводили по общепринятым методам.

Выделенные штаммы стафилококков передавали в Государственный научный центр по антибиотикам (ГНЦА), где проверялась чистота выделенных культур и проводилась их идентификация (APIstaph, “BioMerieux”). До проведения исследования культуры хранили в полужидком агаре при 4њС. Культуры, контаминированные посторонними микроорганизмами, в дальнейшие исследования не включали.

На первом этапе изучения антибиотикочувствительности определяли минимальные подавляющие концентрации (МПК) оксациллина.

Далее в отношении оксациллиночувствиттельных стафилококков оценивали активность ампициллина, ампициллин/сульбактама, цефаклора, цефамандола, цефазолина, цефотаксима, ципрофлоксацина, клиндамицина, эритромицина, тетрациклина, гентамицина, триметоприм/сульфаметоксазола.

В отношении оксациллинорезистентных стафилококков определяли активность ванкомицина, ципрофлоксацина, фузидина, рифампицина, гентамицина, тобрамицина, амикацина, тетрациклина, эритромицина, клиндамицина, хлорамфеникола, триметоприм/сульфаметоксазола.

Определение МПК и интерпретацию результатов проводили в соответствии с рекомендациями и критериями NCCLS [1].

В лунки планшет для иммунологических исследований вносили по 50,0 мкл растворов антибиотиков в среде Mueller-Hinton Broth II (“BBL”) с таким расчетом, чтобы при 2-кратном разведении в лунках планшет создавались концентрации, соответствующие заданным.

Планшеты с растворами антибиотиков замораживали при -70њС, хранили не более 2 нед. При проведении исследований штаммы микроорганизмов пассировали на среде Mannitol Salt Agar (“BBL”) в течение 24 ч.

Из изолированных колоний готовили суспензию по стандарту мутности McFarland 0,5 на дистиллированной воде и доводили до концентрации 106 КОЕ/мл в среде Mueller-Hinton Broth II (“BBL”). Приготовленную суспензию вносили по 50,0 мкл в лунки планшет (предварительно размороженных).

Инокулированные планшеты инкубировали в течение 18 ч при 35-37њС. За МПК принимали наименьшую концентрацию антибиотика, при которой отсутствовал видимый рост микроорганизмов. При оценке чувствительности к оксациллину в питательную среду добавляли NaCl до конечной концентрации 2,0%, планшеты инкубировали при 35њС в течение 48 ч. В качестве контроля использовали референтный штамм Staphylococcus aureus АТСС 29213.

Для статистической обработки данных использовали программу WHONET4.

Далее…

Источник: http://nature.web.ru/db/msg.html?mid=1176542&uri=index4.html

Страница Врача
Добавить комментарий